本试剂盒仅限于科学研究用途，严禁用于医学诊断。本文将为您介绍人巨噬细胞炎性蛋白5（MIP-5）Elisa试剂盒的使用说明及检测原理。

检测原理

该试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。在预先包被的adropin（AD）抗体包被微孔中，依次添加样本、标准品和HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤后，使用底物TMB进行显色。TMB在过氧化物酶的催化下呈现蓝色，随后在酸的作用下转化为最终的黄色。而颜色的深浅与样本中adropin（AD）的浓度成正相关。最后，使用酶标仪在450nm波长下测量吸光度（OD值），以计算样本浓度。

样品收集、处理及保存方法

样品的采集与处理至关重要，具体步骤如下：

1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，避免操作过程中任何细胞刺激。收集血液后，以3000转/分钟速度离心10分钟，将血清与红细胞迅速分开。
2. 血浆：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝，3000转/分钟离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液：以3000转/分钟离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织与生理盐水按比例混合后进行捣碎，随后以3000转/分钟离心10分钟取上清。
5. 保存：如样本未能及时检测，请按单次使用量分装，保存于-20℃以避免反复冻融。在室温下解冻时，务必确保样品均匀充分解冻。

操作注意事项

在使用本试剂盒时，请注意以下操作细节，以保证实验结果的准确性:

• 标准品（S0-S5）的浓度：依次为：0、25、50、100、200、400pg/mL。
• 20×洗涤缓冲液的稀释：请将蒸馏水按1:20进行稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

结果判断

为了准确评估实验结果，需绘制标准曲线。在Excel中，以标准品浓度为横坐标，对应的OD值为纵坐标，绘制标准品线性回归曲线依据曲线方程计算样本浓度值。

免责声明

本试剂盒由尊龙凯时品牌提供，确保高效与优质。请使用者在实验过程中严格遵循上述说明，以获取最佳实验效果。